Техника исследования вагинальных мазков при трихомониазе. Окраска, микроскопия препарата.

Билет № 1

Техника исследования вагинальных мазков при трихомониазе. Окраска, микроскопия препарата.

Отделяемое из уретры берут пластиковой одноразовой стерильной бактериологической петлёй объёмом 1 мкл или тонким дакроновым тампоном на алюминиевой проволоке.

Предварительно наружное отверстие уретры следует очистить марлевым или ватным тампоном.

При отсутствии видимых выделений врач может выполнить лёгкий массаж уретры.

Тампон/петлю вводят в уретру на 1–2 см и вынимают, слегка нажимая на боковые и заднюю стенки.

Для микроскопического и иммунофлюоресцентного исследования материал переносят на предметное стекло, прокатывая по нему тампон или передвигая петлю с материалом с лёгким нажимом.

Для культурального исследования и ПЦР материал помещают в пробирки с соответствующими транспортными средами.

Наружные половые органы, преддверие влагалища: мазки берут стерильными ватными (дакроновыми) тампонами с патологически изменённых участков; при воспалении большой железы преддверия проводят пункцию, при вскрытии абсцесса железы берут гной стерильным ватным тампоном.

Красим по:

Анилиновые красители
Окраска по Романовскому
Нативный препарат

2. Принцип метода определения остаточною хлора в питьевой воде. Гигиеническое значение данного показателя.

Йодометрический метод определения содержания остаточного хлора в питьевой воде.

Содержание остаточного свободного хлора в воде 0,3-0,5 мг/ , после 30-минутного контакта хлора с водой, большие количества хлора придают воде запах и привкус хлора.

Сначала определяют щелочность исследуемой воды,которую предварительно дехлорируют с помощью тиосульфата натрия, а затем в коническую колбу насыпают 500 мг йодида калия, растворяют его в 1-2 мл дистиллированной воды, добавляют буферный раствор, после этого добавляют 250 мл анализируемой воды.

Выделившийся йод оттитровывают 0,001 н.раствором тиосульфата натрия до появления светло-желтой окраски, затем прибавляют 1 мл 0,5% раствора крахмала и титруют до исчезновения синей окраски.

Содержание хлора определяют по формуле.

3. Алгоритм взятия материала на холерный вибрион, посев на 1% пептоновую воду Оценка результатов.

Исследования стерильной ложкой берут испражнения, рвотные массы, промывные воды больного в объеме 10-20 мл, переносят их раздельно в стерильные стеклянные банки, закрывают стеклянными или резиновыми пробками и заливают парафином.

Наилучшие результаты дает исследование проб, взятых до начала антимикробной терапии.

Вторую порцию испражнений и рвотных масс в объеме 1-2 мл засевают у постели больного в 10-50 мл транспортной среды (1% пептонная вода рН 7,8 или рН 9,3).

Чистая культура холерного вибриона может быть выделена на любом этапе — с прямого посева материала или в пересевах со сред обогащения.

Обычно предварительный диагноз ставят через 5—6 часов, окончательный — через 24— 36 час.

Щелочелюбив, оптимальный рН 7,6—8,0, однако хороший рост отмечается и при рН 9,2.

Строгий аэроб.

Растет при температуре от 16 до 40°С (оптимум 37°С).

В щелочных средах быстро размножается, опережая рост других микробов.

На 1% пептонной воде уже через 6— 8 ч отмечается обильный рост в виде нежной голубовато-серой пленки; остальная часть среды лишь слегка диффузно мутнеет.

На чашках со щелочным агаром через 10—12 ч вырастают гладкие, плоские, полупрозрачные, колонии с голубоватым оттенком.

Контроль пред стерилизационной очистки медицинских изделий и растворов моющего средства.

Процессы при проведении обработки

1. По завершению дезинфекций ИМН ополаскиваются проточной водой, затем: замачиваются при полном погружении в один из растворов моющего средства 20-25С. Мин 15.

2. Мытье каждого изделия в моющем растворе при помощи ерша или ватно-марлевого тампона. 5 сек.

3. Ополаскивание проточной водой. 10 мин

4. Ополаскивание дистиллированной водой. 50 сек

5. Сушка горячим воздухом в сушильном шкафу. 85С до полного исчезновения влаги.

Билет № 2

1. Алгоритм взятия крови и подсчет количества эритроцитов в камере Горяева.

§ Ставим пробирки в штатив и нумеруем.

§ Пипеткой в 5 мл. разливаем 3,5 % физраствор по 4 мл. в каждую

§ пробирку.

§ Пипеткой на 0,02 мл. набираем кровь без воздушных пузырьков до метки.

§ Стираем кровь с наружных сторон пипетки.

§ Убедитесь, что кровь в пипетке находится на том же уровне.

§ Выдуйте кровь из пипетки в пробирку с 3,5 % физраствором, сполоснув

§ ее при этом в верхнем слое физраствора не менее 3(трех) раз (разведение

§ 1:200)

§ Убедитесь, что номер на пробирке совпадает с номером на направлении.

§ Закрыв пробирку пробкой , хорошо перемешайте полученную смесь в

§ течение двух минут.

§ Положите покровное стекло на счетную камеру Горяева и осторожно

§ двигая и надавливая притрите стекло к камере пока не появятся радужные

§ кольца на покровном стекле ( К.Ньютона);

§ Стеклянной палочкой с оплавленным концом берем каплю смеси и

§ подносим к краю покровного стекла, что бы заправить одну сторону

§ счетной камеры.

Дайте камере постоять две-три минуты для оседания элементов крови.

Подсчет:

При подсчете эритроцитов используйте объектив 10х или 40х на окуляр 10х.

Поместить камеру на столик микроскопа и направить фокус на центр камеры.

Перевести объектив на 40х и найти сетку камеры при слабом освещении.

Эритроциты считаем в 5 (пяти) больших квадратах (каждый из которых разделен на 16 мелких) по диагонали камеры, начиная с верхнего левого квадрата.

Считаем все эритроциты в нутрии большого квадрата, те эритроциты которые лежат на разграничивающей линии но большей половиной заходят внутрь квадрата, а те которые пересечены по полам ,считаем только на двух сторонах –ВЕРХНЕЙ и ЛЕВОЙ

Расчет:

Записываем количество эритроцитов в 5 больших квадратах (80 малых)

Пример: ЭР-430

Упрощенный метод подсчета : 430 х 10.000 х 10 ‑‑ = 4,3 х 10‑‑ л.

Количество ЭР-в одном литре крови 4 млн 300 тысяч.

Нормальное содержание ЭР в одном литре крови

-МУЖ 4,5 х 10--л.– 6.5 х 10-‑л.

-ЖЕН 4,4 х 10‑‑ л. ‑ 6.0 х 10‑‑л.

Билет № 3

1. Алгоритм взятия крови из пальца. Методика определения СОЭ.

Исследования крови следует всегда производить в одно тоже время при одинаковых условиях, до приема пищи.

Кровь берут из IV пальца левой руки.

Перед уколом палец дезинфицируют и обезжиривают, протирая его ватой, смоченной спиртом, а затем эфиром или их смесью.

Прокол производят либо стерилизованным скарификатором, либо иглой Франка со сменными стерилизуемыми лезвиями. Укол обычно производится в верхушку мякоти первой фаланги на глубину 2,5 - 3 мм.

Полученную после укола первую каплю снимают фильтровальной бумагой или ватой, смоченной эфиром.

Кровь для исследования берут в определенном порядке: для определения СОЭ, гемоглобина, затем - для подсчета лейкоцитов и эритроцитов; делают мазки.

После взятия крови, мякоть пальца оборачивается смоченной эфиром или спиртом ватой и прижимается к ладони для того, чтобы остановить кровотечение.

Перед использованием химический чистый капилляр промывают цитратом натрия и заполняют им пробирку на 1 к 4 (до метки 0,75)

Кровь набирают полный капилляр (до метки 0) и переносят в пробирку с цитратом (усиленно выдувая всю кровь).

При этом получают соотношение крови и цитратом.

Закрыв пальцем верхний капилляра, осторожно, чтобы кровь из капилляра не вылилась, устанавливают капилляр в штатив строго вертикально, упирая нижний его конец в резиновую прокладку и прижимая верхний конец прокладкой или пробкой.

Через час отмечают скорость оседания эритроцитов по высоте отстоявшегося слоя плазмы в мл.

Температура помещения 18-20 *С.

Гигрометр волосяной.

Принцип работы основан на свойстве обезжиренных чел волос изменять свою длину в зависимости от влажности.

Изменение длины волос передается стрелке, которая перемещаясь вдоль шкалы, указ относительную влажность воздуха в %. При опр-и влажности в помещении гигрометр подвешивают на стене вдали от источника тепла.

Показания гигрометра следует периодически проверять по аспирационному психрометру, т. к. чувствительность волоса со временем меняется.

Билет № 4

Оценка результатов.

Билет № 5

Методы дезинфекции.

Кипячение и автоклавирование 0,5 атмосфер.

Билет № 6

1. Метод качественного определения белка в моче.

Билет № 7

Окраска по Романовскому—Гимзе.

Краску Романовского-Гимзе наливают на мазок; длительность окраски — 30-35 минут.

По истечении этого срока мазки крови промывают водой и высушивают на воздухе.

При этом способе удается хорошо отличить ядро, но гораздо хуже — нейтрофильную зернистость цитоплазмы, поэтому его широко используют для окраски мазка для оценки лейкоцитарной формулы периферической крови.

Билет № 8

Метод раздавленной капли.

На предметное стекло наносят пипеткой каплю культуры и покрывают ее покровным стеклом.

Чтобы не образовывалось пузырьков воздуха, покровное стекло подводят ребром к краю капли и резко опускают его.

Для предохранения препарата от высыхания его помещают во влажную камеру.

Влажная камера представляет собой чашку Петри, на дне которой находится влажная фильтровальная бумага.

На бумагу кладут две спички и на них помещают препарат.

Чашку закрывают крышкой.

Микро скопируют при увеличении объектива 40х в темном поле.

Метод висячей капли.

Для приготовления препарата необходимы стекло с лункой, покровное стекло и вазелин.

Края лунки покрывают тонким слоем вазелина.

На покровное стекло наносят каплю культуры.

Затем осторожно накрывают покровное стекло стеклом с лункой так, чтобы капля оказалась в центре.

Склеившиеся стекла быстро переворачивают покровным стеклом вверх.

Капля находится в герметической камере и сохраняется долгое время.

При микроскопии сначала при малом увеличении (8х) находят край капли, а затем проводят изучение препарата при большом увеличении.

Билет № 9

Метод Михаэлиса

1 % р-р спиртовой фенолфталеина, для определения общей кислотности. 0,5 % спиртовой р-р деметиламидоабензола, для определения концентрации свободной соляной кислоты.

К 5 мл профильтрованного желудочного сока добавляют 1 каплю диметиламидоазобензола (в присутствии соляной кислоты цвет желтый) и титруют до получения цвета «семги» 0,1 N НС1.

Билет № 10

Алгоритм мытья рук.

Обработка рук с применением антисептика проводится в следующих случаях:

1) перед и после выполнения инвазивных процедур;

2) перед и после проведения манипуляций с повреждением целостности кожных покровов пациента;

3) перед и после манипуляций с ранами и катетерами;

4) после контакта с кровью и другими биологическими жидкостями, выделениями больного;

5) перед и после контакта с пациентами с признаками инфекционных и паразитарных заболеваний;

6) перед осмотром новорожденных.

Для обработки рук используются теплая проточная вода, жидкое мыло и

антисептики во флаконах с локтевым дозатором, одноразовые полотенца или одноразовые салфетки.

Нельзя доливать жидкое мыло и антисептик в частично опорожненный флакон. В качестве антисептика используются средства дезинфекции, разрешенные к применению в Республике Казахстан.

Билет № 11

Билет № 12

Билет № 13

Билет № 14

Билет № 15

Билет № 16

1. Приготовление реактивов для определения лейкоцитов, СОЭ, гемоглобина, эритроцитов. Хранение и маркировка реактивов.

Реактив для определение гемоглобина:Трансформирующий раствор: ацетон-циангидрин — 0,5 мг; калий железосинеродистый — 0,2 г; натрия гидрокарбонат — 1 г; дистиллированная вода — до 1 л. Раствор желтого цвета, прозрачный. При обесцвечивании или появлении осадка непригоден. Стабилен в течение нескольких месяцев при хранении в посуде из темного стекла при комнатной температуре.

Реактив для определение эритроцитов:0,9%-ный раствор хлорида натрия.

Реактив для определение СОЭ:Раствор трехзамещенного цитрата натрия 5% готовят на дистиллированной воде, затем фильтруют. pH раствора должен быть нейтральным или слабощелочным. При помутнении его необходимо заменять свежим. Хранят раствор в холодильнике при температуре 4 °С в течение 5—6 дней.
Реактив для определение лейкоцитов:3–5%-ный раствор уксусной кислоты, подкрашенный для окраски ядер лейкоцитов несколькими каплями раствора метиленового синего. Раствор имеет голубой цвет, может длительно храниться.

При наличии 70%-ной уксусной эссенции для приготовления 1 л 3%-ного уксуса нужно к 43 г эссенции добавить 975 г кипяченой воды.

2. Методика определения органолептических показателей качества хлеба и хлебобулочных изделий.

Хлеб должен соответствовать следующим требованиям:поверхность-гладкая,без крупных трещин и подрывов,Крупными трещинами считают трещины, проходящие через всю верхнюю корку, имеющие ширину более 1 см. Крупными подрывами считаются подрывы, охватывающие всю длину боковой стороны формового хлеба , имеющие ширину более 2 см.окраска -для пшеничного хлеба от светло-желтой до коричневой, без подгорелости и бледности, для ржаного хлеба-равномерная,от светло-коричневой без подгорелости и бледности. Состояние мякиша- характеризуется пропеченностью (должен быть не липким, промешанным,без комков), пористостью(не иметь пустот и признаков закала), эластичностью(при мягком надавливании пальцем должен принимать первоначальную форму),свежестью(не быть черствым), вкусом и запахом,свойственные хлебу(отсутствие кислого, пресного вкуса,горечи,затхлого запаха)

Билет № 17

1. Техника определения гематокрита крови. Вычисление цветного показателя.

Микрометод определения гематокрита (модификация И. Тодорова). Принцип. Центрифугирование крови определенное время при постоянном числе оборотов центрифуги с последующим определением результата по градуированным капиллярам. Реактивы те же.

Оборудование. Центрифуга. Пипетки от аппарата Панченкова (с отрезанным верхним концом и длиной 10–11 см).

Ход определения. В обработанную антикоагулянтом и высохшую пипетку набирают кровь из пальца (или венозную) до верхней метки (100 делений). Пипетку укупоривают, обтягивая ее резиновым кольцом, и центрифугируют 30–40 минут при 3000 об/мин. Результат отмечают по градуировке капилляра, вычитая из 100 высоту столбика эритроцитов.

Нормальные величины. У здоровых людей гематокрит венозной и капиллярной крови равен:
для мужчин — 40–48% (или 0,4–0,48);
для женщин — 36–42% (или 0,36–0,42);

Цветовой показатель. Индекс отражает относительное содержание гемоглобина в эритроцитах.

ЦП=гемоглобин*3/эритроциты

Билет № 18

Химический метод стерилизации.

Химические методы стерилизации

Используются при обработке приборов, аппаратов, сложных оптических систем, крупногабаритных изделий или изделий из титана, полимерных смол, резин.

Для газовой(холодной) стерилизации используют герметичные контейнеры с парами окиси этилена, формальдегида или специализированными многокомпонентными системами.

Для химической стерилизации растворами применяются основных четыре группы веществ:

Кислота+окислитель(например «Первомур»)

Альдегид(например формалин)

Детергент(например хлоргексидина биглюконат)

Галоид(например Повидон-йод)

Концентрации и время стерилизации зависит от используемого антисептика или дезинфектанта.

Билет № 19

1. Техника определения ретракции кровяного сгустка.

Кровь берется натощак из вены сухой иглой без шприца в сухую чистую градуированную пробирку. Номер пробирки и номер на направлении должны совпадать.

- В пробирку с венозной кровью (количество 5 мл) вставляют стержень и оставляют на 24 часа при комнатной температуре.

- По истечению времени, сгусток, который образовался на стержне, перекладывают в другую пробирку.

- Учитываем количество отделившейся сыворотки в первой пробирке. Вычисляем индекс ретракции путем деления объема сыворотки на общий объем взятой для исследования крови. Описываем сгусток крови.

В норме индекс ретракции равен 0,3 - 0,5.

Результат записываем в направлении и в регистрационный журнал, согласно приказу № 332 по форме № 250 / у.

Билет № 20

1. Алгоритм определения группы крови.

Билет № 21

1. Методика количественного определения белка в моче.

Билет № 22

1. Алгоритм определения резус-фактора крови.

Билет № 23

Билет № 24

Паровой метод дезинфекции.

Паровой метод дезинфекции применяют для изделий из стекла, металла, резины, латекса и термостойких полимеров. Производится она централизованно, водяным насыщенным паром под избыточным давлением в автоклаве в стерилизационных коробках. Давление - 0,05 атмосферы, температурный режим - 110°С, экспозиция - 20 мин.

Билет № 25

Воздушный метод дезинфекции.

Применяется для изделий из стекла и металла. Дезинфекцию проводят сухим, горячим воздухом в воздушном стерилизаторе (сухожаровом шкафу) в лотках без упаковки. При температуре 120°С - экспозиция 45 мин.

Билет № 26

1. Техника определения осмотической резистентности эритроцитов.

Основной раствор разводят в 10 раз и получают раствор соответствующий по осмотической концентрации 1% раствору хлорида натрия.

1. Берем штатив с пробирками (40 шт.) объемом 10 мл.;

2. Перед исследованием приготавливаем в пробирках растворы хлорида натрия различной концентрации, пользуясь следующей таблицей:

3. В каждую пробирку добавляем пипеткой Сали по 0,02 мл. крови;

4. Осторожно встряхиваем до гемогенезированной смеси;

5. Оставляем при комнатной температуре (15-25⁰С) на 12-24 ч. или на 1 ч., затем центрифугируем при 2000 об/мин.;

6. Затем смотрим пробирки с маленькой концентрацией гемолиза эритроцитов.

Результат: Определяют минимальную резистентность по пробирке с самой высокой концентрацией хлорида натрия, в которой видно порозовение жидкости, а максимальную по пробирке с самой низкой концентрацией хлорида натрия, в котором незаметно осадка, а жидкость окрашена в розовый цвет.

В норме min. резистентность (начало гемолиза) эритроцитов у взрослых колеблется между 0,48-0,46% NaCl, max(все эритроциты лизированы) 0,34-0,32%;

у грудных детей: maxрезистентность – 0,36-0,40%;min-0,48-0,52%;

у более старших детей: : max-0,36-0,40%,min-0,44-0,48%.

Клиническое значение.

Понижение осмотической резистентности наблюдается при гемолитической анемии. Повышение осмотической резистентности характерно для талассемии, гемоглобинопатии.

2. Методика определения и значение световою коэффициента (СК). Определите СК. если площадь комнаты составляет 20 кв.м., площадь остекленной части окна - 1 кв.м. Дайте гигиеническую оценку полученному результату.

Физический метод стерилизации.

Физический метод дезинфекции основан на уничтожении или удалении патогенных микроорганизмов с поверхности предметов, подлежащих обеззараживанию путем воздействия ряда физических факторов.

Действия высоких температур: обжигания, прокаливания; кипячения, пастеризации; действия горячего воздуха, высушивания.

Действия лучистой энергии: ультрафиолетового излучения; радиоактивного и ионизирующего излучения; тока ультравысокой частоты.

Механические приемы дезинфекции основаны на удалении патогенных микробов путем обмывания, вытряхивания, промывания с использованием мыла и синтетических моющих средств.

Дезинфекцию изделий из стекла, металлов, термостойких полимерных материалов, резины чаще проводят кипячением в дезинфекционном кипятильнике в дистиллированной воде в течение 30 мин, с добавлением 2% соды - 15 мин. Если изделия имеют внутренние каналы, например шприцы, то для удаления остатков крови, сыворотки, других биологических жидкостей и лекарственных препаратов их промывают в емкостях с водой.

Билет № 27

1. Алгоритм взятия крови для определения количества гемоглобина на фотоэлектрокалориметре.

В лабораторной практике исследуют капиллярную кровь, которую получают путем укола в мякоть IV пальца левой руки или мочки уха. Для укола протирают ватным шариком, смоченным сначала спиртом, затем эфиром. Укол лучше производить сбоку, где более густая капиллярная сеть, на глубину 2-3 мм в зависимости от толщины кожи. Кровь из ранки должна вытекать свободно, так как при сильном надавливании на палец возможно примешивание тканевой жидкости, приводящее к искажению результатов.

2. Методика отбора и подготовки проб почвы для физико-химического исследования.

В процедуре лабораторных исследований почвы следует выделить ряд этапов:

1) Этап отбора образцов. Успех исследования зависит от качества испытываемых образцов. Оно в свою очередь обуславливается тем или иным методом отбора, который позволяет направить на изучение наиболее репрезентативные образцы. Стоит иметь в виду, что образцы должны изыматься с глубины от 0,6 до 1,2 м.

2) Анализ образцов почвы. Включает в себя совокупность различных методик, позволяющих наиболее полно и точно установить наличие и содержание в образцах тех или иных веществ.

3) Выдача актов и протоколов анализов, в связи с чем этот этап можно назвать формальным.

Процесс лабораторных исследований почвы позволяет в результате получить точные данные о наличии и концентрации базовых элементов, о наличии и концентрации таких микроэлементов, как медь, цинк, железо, марганец.

В ходе анализа отходов определяется ряд важнейших физико-химическим показателей:

- уровень щелочности

- уровень pH (водородного показателя)

- уровень влажности образцов

- величина сухого и прокаленного остатка

- неорганических веществ, особенно металлов (кадмия, железа, цинка, ртути, хрома, меди и алюминия)

- органических соединений, к которым относятся нефтепродукты, фенолы и хлорфенолы, органические кислоты, полициклические органические углеводороды, а также летучие органические соединения галогенов.

Срок проведения лабораторных исследований почвы находится в пределах 5-10 дней, а за один день отбирается не более 5 проб.

Билет № 28

Обеззараживание отходов крови.

Кровь, собранную в емкость, заливают раствором «Хлорамина Б» из расчета 1:2 (кровь/средство), закрывают крышкой и выдерживают необходимое время. После окончания времени выдержки смесь обеззараженной крови и раствора «Хлорамина Б» утилизируют как медицинские отходы.

– Поверхности, на которые была разлита кровь, а также другие испачканные (забрызганные) кровью поверхности, протирают губкой или ветошью, смоченной раствором средства «Хлорамин Б», оставляют на необходимое время.

– В экстренных ситуациях и при невозможности приготовления растворов пролитую кровь можно засыпать порошком «Хлорамин Б» и оставить до полного впитывания. После чего собрать использованный порошок и утилизировать как медицинские отходы.

Билет № 29

Билет № 30

1. Техника определения удельною веса мочи. Поправка при исследовании.

Относительная плотность мочи (удельный вес):

Мочу наливают в цилиндр, избегая образования пены, затем в неё осторожно погружают урометр. После прекращения его колебаний отмечают относительную плотность по положению нижнего мениска на шкале урометра.

В норме: 1016 – 1025

2. Окисляемость воды. Характеристика данного показателя. Принцип определения перманганатной окисляемости воды.

Окисляемость воды - показатель расхода сильного окислителя в стандартных условиях для окисления органических примесей, содержащихся в 1 л воды. При применении перманганата калия ( KMnO t) - перманганатная, бихромата калия ( KzCfsO. Результаты определения перманганатной окисляемости воды выражают в кислородных или перманганатных единицах ( О2, КМпО4, мг / кг), различающихся в 3 95 раза.

Билет № 31

Билет № 32

Билет № 33

Дезинфекция кипячением.

Физический способ дезинфекции — кипячение, обработка паром и горячим воздухом, а также ультрафиолетовое облучение. Дезинфекция лучше всего достигается при кипячении (100оС на 10 минут), которое убивает все микроорганизмы за исключением некоторых бактериальных спор. Очень важно помнить, что температура, при которой вода кипит, снижается по мере повышения высоты над уровнем моря, при этом надо увеличивать время кипячения. Например, на высоте 4000 метров над уровнем моря, где кипение происходит при 86С, потребуется минимум 20 минут кипения для дезинфекции. Важно отметить, что кипячением не достигается стерилизации. Кипячение используется для обработки белья (кипятят в мыльно-содовом растворе в течение 2 часов), посуды (в 2 % содовом растворе в течение 15 минут), питьевой воды, игрушек, остатков пищи. Паровоздушная смесь используется в дезинфекционных камерах, где обеззараживают вещи и постельные принадлежности. Ультрафиолетовое облучение используется для обеззараживания воздуха помещений.

Билет № 34

1. Расчет и построение калибровочного графика для определения гемоглобина.

1. Установить на используемом фотометре длину волны 540 нм (520-560 нм для ФЭК), подготовить чистые и сухие кюветы с длиной оптического пути 10 мм.

2. Температура измеряемых растворов должна быть в пределах комнатной (18-25° С).

3. Вскрыть ампулы из набора Гемиглобинцианид и измерить оптическую плотность раствора А с минимальной концентрацией гемиглобинцианида против трансформирующего раствора.

4. Вымыть и высушить кювету или сполоснуть ее раствором Б перед измерением оптической плотности раствора Б.

5. Аналогичным образом поступить при определении оптической плотности растворов В и Г.

6. Все измерения повторить 5 раз и рассчитать среднюю арифметическую величину по формуле (6):

Х=Еn/n

где:

X - средняя арифметическая величина оптической плотности, ед. опт. плотн.;

Еn - значения отдельных измерений оптической плотности каждого

из 4 растворов гемиглобинцианида, ед. опт. плотн.; n - число измерений.

7. Построить калибровочный график зависимости средней (формула 6) оптической плотности от концентрации гемоглобина.

8. На горизонтальной оси абсцисс (X) на прилагаемой масштабно - координатной бумаге отложить концентрации гемоглобина в г/л, указанные в аттестате к набору Гемиглобинцианид.

9. На вертикальной оси ординат (У) отложить полученные на спектрофотометре величины оптической плотности.

10. По 4 точкам построить калибровочный график, который должен представлять собой прямую линию и проходить через точку нуля.

Если не удается получить прямую линию, выходящую из начала координат, то это означает, что прибор требует ремонта и на нем нельзя работать.

Если же калибровочный график представляет прямую линию, то по нему можно непосредственно проводить определения гемоглобина в опытных пробах.

2. Методика определения мутности воды. Гигиеническое значение данного показателя.

Определение мутности производят не позднее 24 ч после отбора пробы. Мутность воды связана с присутствием в ней твердых частиц, находящихся в различной степени дисперсности в виде взвешенных веществ. Согласно ГОСТу 2874-82, мутность воды не должна превышать 1,5 мг/ . Мутность воды определяют фотометрически, путем сравнения проб исследуемой воды со стандартными суспензиями. Ход определения: В кювету с толщиной поглощаемого свет слоя 5-10 см вносят хорошо взболтанную исследуемую воду, измеряют оптическую плотность в зеленой части спектра. Контрольной жидкостью служит исследуемая вода, из которой удалены взвешенные вещества путем центрифугирования или фильтрования через мембранный фильтр №4. Мутность определяют по калибровочному графику.

Билет № 35

Физические свойства желчи

1. Цвет - цвет желчи А и С в норме золотисто-желтый, порция В темно-оливковый или коричневый.

2. Прозрачность - Прозрачность всех трех порции в норме прозрачная.

3. Консистенция - Порции А и С слегка вязкая, В-вязкая.

4. Количество - Количество доставленной в лабораторию желчи порции А,В,С измеряем в цилиндре. В норме порция А должна составлять 15-20 мл, в порции В 40-45 мл, норма порции С составляет продолжительное время нахождения зонда в двенадцатиперстной кишке.

5. Относительная плотность - удельный вес желчи порции А 1,007-1,015, порции В 1,016-1,034, порции С 1,007-1,010.

Желчь наливают в цилиндр, избегая образования пены, затем в нее осторожно погружаем урометр. После прекращения его колебания отмечают относительную плотность по положнию нижнего мениска на шкале урометра. И так измеряем порции В и С.

6. Реакция желчи - Пузырная желчь имеет РН 6,5-7,3, печеночная 7,5-8,2 Желчь исследуется сразу. К 2-3 мл добавляют 1-2 капли рабочего раствора индикатора.

Микроскопия

1. Для исследования берут желчь без примеси желудочного сока. Желчь помещают в центрифужную пробирку, затем центрифигируют 5 минут при 2000 об/мин.

2. Затем сливаем верхний слой, оставшийся осадок переносим в предметное стекло.

3. Изучение препарата начинают с малого увеличения для общего обзора, а более детальное изучение препарата с количественной оценки структур производят при большом увеличении. При микроскопии желчи обнаруживаются следующие элементы:

1) клетка 2) кристаллические образования 3) паразиты 4) бактерии

4. Нормальная желчь почти не содержит никаких клеточных элементов; иногда в ней имеется небольшое количество кристаллов холестерина. 0

5. Результаты записываем в бланк и в журнал (по приказу 332).

А желчь дезинфицируем 1:5 гепохлорид.

6. Использованные пробирки дезинфицируем методом 2-ух емкостей.

2. Методика определения щелочности воды. Гигиеническое значение данного показателя.

Щелочностью называют способность сильной кислоты реагировать с различными компонентами природной воды. Различают свободную и общую щелочности. Общую щелочность составляют ионы гидроксила, карбоната и гидрокарбоната. В связи с этим титрование до pH=8,3 позволяет определить свободную щелочность, а титрование до pH=4,5 - общую.

Определение свободной щелочности
100 мл анализируемой природной воды титровать 0,1н HCl с индикатором фенолфталеин. Поскольку переход окраски несколько сглажен, титровать следует на белом фоне, сравнивая окраску с перетитрованной пробой.
Результат принято выражать в мг-экв/л.

Определение общей щелочности
100 мл анализируемой природной воды титровать 0,1н HCl с индикатором метиловый оранжевый до перехода окраски из желтой в оранжевую. После перехода окраски следует начать продувать через пробу воздух в течение 2-3 минут. Если после этого окраска изменилась, то необходимо продолжить титрование.
Результат принято выражать в мг-экв/л.

3. Методика взятия смывов с рук и оборудования в кабинете на бактерии групп кишечной палочки. Оценка результатов.
Техника взятия смывов

Взятие смывов производится с помощью стерильных увлажненных ватных тампонов. Стерильные ватные тампоны на стеклянных, металлических или деревянных палочках, вмонтированных в пробирки с ватными пробками, заготавливают заранее в лаборатории. В день взятия смывов в каждую пробирку с тампоном наливают (в условиях бокса над горелкой) по 5 мл стерильного 0,1% водного раствора пептона таким образом, чтобы ватный тампон не касался жидкости

Среда кода, жидкая среда. Синего и зеленого.
Берем с рук тампоном с верхней части между пальцев и опускаем.
И в термостат на сутки 37°С.

Билет № 1

Техника исследования вагинальных мазков при трихомониазе. Окраска, микроскопия препарата.

Отделяемое из уретры берут пластиковой одноразовой стерильной бактериологической петлёй объёмом 1 мкл или тонким дакроновым тампоном на алюминиевой проволоке.

Предварительно наружное отверстие уретры следует очистить марлевым или ватным тампоном.

При отсутствии видимых выделений врач может выполнить лёгкий массаж уретры.

Тампон/петлю вводят в уретру на 1–2 см и вынимают, слегка нажимая на боковые и заднюю стенки.

Для микроскопического и иммунофлюоресцентного исследования материал переносят на предметное стекло, прокатывая по нему тампон или передвигая петлю с материалом с лёгким нажимом.

Для культурального исследования и ПЦР материал помещают в пробирки с соответствующими транспортными средами.

Наружные половые органы, преддверие влагалища: мазки берут стерильными ватными (дакроновыми) тампонами с патологически изменённых участков; при воспалении большой железы преддверия проводят пункцию, при вскрытии абсцесса железы берут гной стерильным ватным тампоном.

Красим по:

Анилиновые красители
Окраска по Романовскому
Нативный препарат

2. Принцип метода определения остаточною хлора в питьевой воде. Гигиеническое значение данного показателя.

Йодометрический метод определения содержания остаточного хлора в питьевой воде.

Содержание остаточного свободного хлора в воде 0,3-0,5 мг/ , после 30-минутного контакта хлора с водой, большие количества хлора придают воде запах и привкус хлора.

Сначала определяют щелочность исследуемой воды,которую предварительно дехлорируют с помощью тиосульфата натрия, а затем в коническую колбу насыпают 500 мг йодида калия, растворяют его в 1-2 мл дистиллированной воды, добавляют буферный раствор, после этого добавляют 250 мл анализируемой воды.

Выделившийся йод оттитровывают 0,001 н.раствором тиосульфата натрия до появления светло-желтой окраски, затем прибавляют 1 мл 0,5% раствора крахмала и титруют до исчезновения синей окраски.

Содерж