Категории: ДомЗдоровьеЗоологияИнформатикаИскусствоИскусствоКомпьютерыКулинарияМаркетингМатематикаМедицинаМенеджментОбразованиеПедагогикаПитомцыПрограммированиеПроизводствоПромышленностьПсихологияРазноеРелигияСоциологияСпортСтатистикаТранспортФизикаФилософияФинансыХимияХоббиЭкологияЭкономикаЭлектроника |
СБОР МОЧИ ДЛЯ МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИХ ИССЛЕДОВАНИЙПосев мочи (с определением чувствительности к антибиотикам) Сбор мочи необходимо проводить до начала медикаментозного лечения и не ранее 5-ти дней после проведенного курса лечения. Мочу собрать в стерильный контейнер: ПЕРВЫЕ 15 мл МОЧИ СЛИТЬ В УНИТАЗ. Последующие 3-10 мл собрать в стерильный контейнер, плотно закрутить крышку. Доставить биоматериал в лабораторию в течение 1,5-2 часов после сбора. Допускается хранение биоматериала в холодильнике (при t +2° +4° С) не более 3-4 часов. Как правило, в день доставки из транспортной среды, содержащей мочу и тиогликолят Na, проводят количественный посев секторами на 5% кровяной агар: Платиновой петлей диаметром 2 мм, емкостью 0,005 мл берут каплю мочи и делают 30-40 штрихов на сектор А чашки Петри. Прожигают петлю и производят 4 штриха через сектор А в сектор I. Аналогичным образом из сектора I засевают сектор II, а из сектора II - сектор III. Чашки инкубируют при 37 оС 24 часа. При отсутствии роста инкубацию пролонгируют до 3 суток. Учет результатов проводят по специальной таблице.
Либо производят серийные разведения: берется 1 мл, либо 0,1 мл мочи. Последовательно разбавляется в 10 раз с посевом на 5% кровяной агар. Чашка, в которой еще наблюдается рост считается диагностическим титром. Алгоритм лабораторной диагностики мочекаменнной болезни: Смотри в тетради по микробиологии метод серийных разведений. 1) ОАМ и ОАК 2) Выявление бактериурии тест-полосками содержащими нитриты в случае присутствия Esherihia coli, Proteus, Klebsiella, Citrobacter, Salmonella, энтерококки, стафилококки и Pseudomonas в моче служит основанием для бакпосева мочи с определением титра микробов и определения ЧАБ. Норма ОМЧ <105 мт/мл 3) Анализ на суточную потерю белка 4) БАМ на K. Na Ca. Mg и БАК на K Ca Mg Na 5) Анализ на креатинин мочи, сыворотки крови; определение Скорости Клубочковой Фильтрации.
анализ суточной мочи: кальций, фосфор, мочевая кислота, креатинин, оксалат, цитрат, натрий, магний, аммоний, рн;
Подготовка анализаторов к проведению анализа мочи и крови. Modular PP Принцип работы прибора Энзиматический метод: Добавляют реагент 1 (глицерол). Свободный глицерол преобразуется в Г3Ф при участии ГК. Г3Ф под действием ГФО превращается в ДГАФ и перекись водорода. Перекись водорода совместно с 4-хлористым фенолом под действием пероксидазы вызывает окисление продукта не дающее реакции с компонентом колориметра (реагент 2). Прим. Г3Ф-глицерол3фосфат. ГФО-глицеролфосфатоксидаза. ГК-глицеролкиназа. ДГАФ-дигидроксиацетонфосфат Показания регистрируются при длине волны 505 нм и 700нм. Метод 2-реагентный. Конечная точка реакции специфична для триглицеридов. Липемичные образцы крови разводят 1:5 и результат умножают на 5. Общий принцип работы анализаторов: Используют либо турбидиметрический метод, либо метод проточной цитометрии либо спектрофотометрию. Персонал надевает антистатичные халаты, спрей-защитные, перчатки нитриловые либо резиновые. В случае невозможности исследования в день забора пробы крови хранят при +4 в холодильнике либо Гипонатриемия, гигантские тромбоциты, белки и парапротеины патологической плазмы крови, гиперлейкоцитоз, повышенная глюкоза в крови, Липемия, желтуха, холодовая и тепловая агглютинация, гемолиз, дисбаланс электролитов, фрагменты мегакариоцитов и лейкоцитов; чрезмерное раскачивание могут повлиять на результаты анализов. Фрагменты эритроцитов, микроцитов и цитоплазмы лейкоцитов могут вызвать интерференцию тромбоцитов. Анализ можно выполнить в ручном либо в автоматическом режиме. Используется от 1 до 8 мл образца на анализ. Окрашивающий реагент на лейкоциты хранят в темноте. Результаты записываются на дискету объемом 1,44 МB. В анализаторах по типу проточных цитометров используются лазеры. Пробы крови перемешать с антикоагулянтом (ЭДТА либо гепарин либо цитрат Na) вручную либо на шейкере, проверить наличие сгустков фибрина, нитей тромбоцитов, на гематологическое исследование делается мазок крови, затем кровь закладывается в анализатор, эритроциты и тромбоциты определяются методом гидродинамической фокусировки, HB-методом сульфгемоглобинового определения на биохимическое исследование центрифугируют пробы крови и отделяют супернатант в отдельную пробирку либо в эппиндорф (при малом объеме сыворотки), мочу не центрифугировать, проверить наличие пузырьков воздуха в пробах крови и мочи, прочистите внешние поверхности прибора, замените пломбы на шприцах, проверьте уровень реагентов и отсутствие роста бактерий в них, уровень промывочного и рабочего растворов, буферного раствора, тест-полосок, калибратора, включить прибор, прогреть его, установить дату и время автоматического включения прибора, убедиться что прибор подключен к информационной сети, отсутствуют неисправности и ошибки, провести калибровку спектрофотометра, тест-полосок (причем даты последующих калибровок задаются автоматически), промыть проточные ячейки, загрузить пробы соответственно рельсе подачи приемного лотка, анализатор считывает штрихкод штатива, затем штрих-код пробы. провести инкубацию проб, измерить оптическую плотность продукта реакции при определенной длине волны либо в двухволновом режиме при определенной температуре, либо тест-полосками измерить физико-химические свойства мочи, взболтать образец, и определенный объем образца промикроскопировать встроенным в анализатор микроскопом, сделать снимки полей зрения и перевести результаты в бланк, промыть проточные ячейки, вернуть пробы, провести контроль качества: положительный с патологической сывороткой крови человека, изготавливаемый торговым предприятием и отрицательный с нормальной сывороткой крови пациента, при необходимости вызвать мастера, отключить прибор. В методе проточной цитометрии измеряется фронтальное рассеивание света и боковое флуоресцентное излучение. Если необходимо лизировать клетки образца то используют лизирующий реагент. Для определения гемоглобина используют свободный цианид. |
||||||||||||||||||||||||
Последнее изменение этой страницы: 2016-06-10 lectmania.ru. Все права принадлежат авторам данных материалов. В случае нарушения авторского права напишите нам сюда... |