Окраска фиксированных мазков по методу Циля-Нильссена

Приготовление мазка из культуры споровой палочки и окраска метиленовым синим

Выявление капсул по Бурри-Гинсу

Принцип метода: капсула, не воспринимающая красители из-за высокого содержания воды, не окрашивается и хорошо видна (не окрашена) на темном фоне. Вегетативная часть бактерии окрашивается фуксином в розовый цвет.

Результаты окрашивания:

Методы выявления жгутиков

Особенности препаратов «висячей» или «раздавленной»

капли:

а)

б)

в)

г)

д)

Приготовление препарата «раздавленная» капля из культуры кишечной палочки.

Подпись преподавателя

ЗАНЯТИЕ № 4

«Морфология и репродукция вирусов и бактериофагов. Принципы лабораторной диагностики вирусных инфекций. Методы культивирования вирусов и бактериофагов»

ЦЕЛЬ:ознакомиться с морфологией вирусов и бактериофагов, их репродукцией, методами культивирования и принципами диагностики вирусных инфекций.

ПЛАН

ДОМАШНЕЕ ЗАДАНИЕ

Вирусология как наука

1.1.Вирусы – неклеточные формы жизни, обладающие собственным геномом и способные к воспроизведению лишь в клетках более высокоорганизованных существ.

1.2.Отличия вирусов от бактерий:

а) б)

в) г)

д) е)

1.3.Вирусы были открыты

Принципы классификации вирусов

2.1.Вирусы классифицируются:

-По типу НК а) б)

-По форме а) б)

в) г)

-По размерам а) б) в)

-По типу симметрии а) б) в)

-По организации а) б)

Морфология и химический состав вирусов

3.1.Соотношение формы вириона и типа симметрии

3.2. Особенности вирусных белков

а)

б)

3.3.Классификация вирусных белков по происхождению

а)

б)

в)

Взаимодействие вируса с клеткой

4.1.Стадии взаимодействия вируса с клеткой

а) адсорбция –

б) проникновение вируса в клетку происходит путем:

в) депротеинизация –

г) эклипс-фаза –

д) сборка

е) выход вируса из клетки

Определение и морфология бактериофагов

5.1.Бактериофаг –

5.2.Морфологические формы фагов

а)б)

в) г)

д) е)

Репродукция бактериофагов

6.1.Вирулентный бактериофаг

6.2.Умеренный бактериофаг

6.3.Лизогения –

6.4.Лизогенная (фаговая) конверсия –

6.5.Профаг-

Практическое применение батериофагов

Методы лабораторной диагностики вирусных инфекций.

А) Б) В)

Г)

Методы культивирования вирусов

Сущность культивирования заключается в их накоплении с последующим изучением свойств в:

А)Б)В)

Культивирование вирусов в организме восприимчивых животных

10.1.Методы индикации в организме восприимчивого животного:

а)

б)

в)

10.2.Идентификация вирусов производится

Метод овокультур

11.1.Метод овокультур –

11.2.Способы индикации вируса в овокультуре

а)

б)

в)

г)

д)

11.3.Реакция гемагглютинации в вирусологии –

11.4.Идентификация вирусов производится с помощью

11.5.Преимущества метода

а)

б)

в)

г)

Выращивание вирусов в культуре клеток

12.1.Культура клеток –

12.2.Культуры клеток классифицируются

а)

б)

в)

12.3.Методы индикации вируса, выращенного в культуре клеток

а) б)

в) г)

д) е)

12.4.Сущность цветной пробы Солка –

12.5.Цитопатическое действие –

12.6.Метод бляшкообразования (феномен Дальбекко)

12.7.Механизм реакции гемагглютинации –

Выделение, идентификация и титрование бактериофагов

13.1.Выделение бактериофага осуществляется путем фильтрации исследуемого материала (содержащего фаг) через бактериальные фильтры или обработка его хлороформом для освобождении его от бактерий и грибов.

13.2.Индикация и идентификация бактериофагов. Качественные пробы на бактериофаг.

А.Проба Отто. Сущность метода – доказательство присутствия фага – в месте попадания фага роста чувствительной культуры, появление мелких стерильных пятен (негативных колоний фага)

Б.Двухслойный метод Грациа – на питательный агар наносят расплавленный агар с исследуемым материалом и чувствительной культурой. После инкубации о присутствии фага судят по наличию прозрачных пятен на фоне глубинного роста бактерий

В.Метод Фишера (метод фаговых дорожек) – отсутствие роста чувствительной культуры в месте стекания капли с исследуемым фагосодержащим материалом

13.3.Определение количества фага (титрование)

а.титр бактериофага – максимальное разведение фагосодержащего материала, при котором отмечается лизис чувтвительных бактерий

б.индекс фага – количество бактериофага, содержащегося в единице объема материала (БОЕ/мл)

13.4.Титрование фага в жидкой среде по Аппельману – в ряд пробирок вносят кратные разведения фагосодержащего материала и индикаторную чувствительную культуру, после инкубации учитывают результат – отсутствие роста означает присутствие фага и результат (+), рост чувствительной культуры свидетельствует об отсутствии фага, результат (-).

13.5.Метод агаровых слов по Грациа

В пробирки с расплавленным агаром вносят индикаторную культуру и 1 мл (деляют кратные разведения) фагосодержащего материала. После инкубации подсчитывают число негативных колоний фага и делают пересчет на 1 мл неразведенного исследуемого материала.

ПРАКТИЧЕСКАЯ РАБОТА

Посев фекалий на среды Эндо, Левина, Плоскирева

Подпись преподавателя

ЗАНЯТИЕ № 5